تعداد نشریات | 25 |
تعداد شمارهها | 932 |
تعداد مقالات | 7,652 |
تعداد مشاهده مقاله | 12,493,176 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 8,884,810 |
کلون و بیان آنتی بادی مونوکلونال نوترکیب تک زنجیره ای scFV علیه آنتی ژن Carcinoembryonic | ||
زیست شناسی کاربردی | ||
دوره 35، شماره 4 - شماره پیاپی 74، اسفند 1401، صفحه 85-98 اصل مقاله (751.94 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22051/jab.2022.40855.1495 | ||
نویسنده | ||
مریم صلواتی فر* | ||
استادیار ،گروه فیزیولوژی هوافضایی، پژوهشگاه هوافضا وزارت علوم، تحقیقات و فناوری، تهران، ایران | ||
چکیده | ||
فناوری آنتی بادیهای نوترکیب، تولید و کاربرد این نوع آنتی بادیها را متحول نموده و برخی محدودیتهای فناوری هیبریدوما را مرتفع نمود. آنتی بادیهای مونوکلونال توانایی بالایی به عنوان عوامل تشخیصی، درمانی و به ویژه هدف قراردادن سلولهای سرطانی دارند، اما کاربرد آنها به واسطه اندازه بزرگشان با محدودیتهایی مواجه است. ساختار نواحی آنتی بادی امکان تقسیم بندی آنها را به زیر واحدهای کارا فراهم میسازد که این بخشها میتوانند با ترکیب شدن و اتصالات مختلف، مولکولهای جدید کارآمدی را ایجاد نمایند. مولکولهای scFvنسبت به آنتی بادی اولیه، به دلیل کاهش اندازه مزایای بسیاری دارند که مهمترین آنها، کاهش پاسخهای ایمنی نسبت به آنتی بادی کامل موشی به واسطه فقدان بخشهای ثابت میباشد. در این تحقیق ژن نواحی متغیر آنتی بادی مونوکلونال ضد مارکر توموری کارسینوامریونیک به صورت scFV ساخته شده و در ناقل فاژمیدی کلون شده و سپس بیان گردید. همچنین اختصاصیت آن توسط آزمون وسترن بلاتینگ بررسی شد. طبق نتایج حاصله ژن scfv با موفقیت ساخته شد. سپس کلونینگ و بیان آن انجام پذیرفت. در نهایت اختصاصی بودن آن نسبت به مارکر توموری کارسینوامریونیک، با وسترن بلاتینگ تائید گردید. آنتی بادی نوترکیب scFV بیان شده در این پژوهش، علی رغم کاهش اندازه، به طور اختصاصی قادر به شناسی آنتیژن بود و از اینرو میتوان از آن در تشخیص و پایش برخی سرطانها استفاده نمود. در مجموع ، از این روش می توان برای سنتز آنتی بادی های نوترکیب نوع scFV علیه سایر آنتی ژنها استفاده کرد و از آنها در تستهای مختلف تشخیصی و درمانی بیماریها استفاده نمود. | ||
کلیدواژهها | ||
هیبریدوما؛ مارکر توموری؛ کلونینگ | ||
عنوان مقاله [English] | ||
Cloning and expression of recombinant scFV monoclonal antibody against Carcinoembryonic antigen | ||
نویسندگان [English] | ||
maryam Salavati far | ||
Assistant Professor, Aerospace Physiology Department, Aerospace Research Institute, Ministry of Science, Research and Technology, Tehran, Iran | ||
چکیده [English] | ||
Recombinant antibody technology has revolutionized the production and use of these kinds of antibodies and removed some of the hybridoma technology limitations. Monoclonal antibodies have high potential as diagnostic and therapeutic agents, especially in targeting cancer cells, but their use has been limited due to their large size. The special structure of different regions of antibodies allows to divide them into efficient subunits, which can combine to form new molecules with efficient properties. Due to the reduced size of scFv molecules compared to the primary antibody, they have many advantage. The most important of which is the reduction of immune compare to complete mouse antibodies due to the lack of constant fragments. In this study, the variable regions of gene carcinoembryonic tumor marker monoclonal antibody were constructed as scFV and cloned into the phagemid vector. Then its specificity was investigated by the western blotting test. The scFV gene was successfully constructed. Then cloning and expression was performed. Finally, its specificity was confirmed by western blotting. The recombinant scFV antibody expressed in this study, due to size change, was able to specifically identify the carcinoembryonic tumor marker, and therefore it can be used in the diagnosis of some cancers. This recombinant antibody was specifically capable of carcinoembryonic tumor marker recognition. Therefore, it can be applied to some cancers diagnosis and monitoring. In addition, this method can be used to synthesize scFV-type recombinant antibodies against other antigens. So that they can be used in various diagnostic tests and treatment most of diseases. | ||
کلیدواژهها [English] | ||
Hybridoma, Tumor marker, Cloning | ||
سایر فایل های مرتبط با مقاله
|
||
مراجع | ||
Agrawal, S., A. Gupta, S. Gupta, B. Goyal, R. A. T. Siddeek, D. Rajput, U. Chauhan, S. Kishore, M. Gupta and R. Kant (2020). "Role of carbohydrate antigen 19-9, carcinoembryonic antigen, and carbohydrate antigen 125 as the predictors of resectability and survival in the patients of Carcinoma Gall Bladder." Journal of Carcinogenesis 19. Albrecht, H., P. A. Burke, A. Natarajan, C.-Y. Xiong, M. Kalicinsky, G. L. DeNardo and S. J. DeNardo (2004). "Production of soluble ScFvs with C-terminal-free thiol for site-specific conjugation or stable dimeric ScFvs on demand." Bioconjugate chemistry 15(1): 16-26. Borghaei, H., M. K. Robinson and L. M. Weiner (2006). Monoclonal antibody therapy of cancer. Immunotherapy of Cancer, Springer: 487-502. Choi, J. and S. Lee). 2004). Secretory and extracellular production of recombinant proteins using Escherichia coli." Applied microbiology and biotechnology 64(5): 625-635. Ghasemi, F., A. Zomorodipour, S. Shojai, F. Ataei, M. Khodabandeh and M. H. Sanati (2004). "Using L-arabinose for production of human growth hormone in Escherichia coli, studying the processing of gIII:: hGH precursor." Hall, C., L. Clarke, A. Pal, P. Buchwald, T. Eglinton, C. Wakeman and F. Frizelle (2019). "A review of the role of carcinoembryonic antigen in clinical practice." Annals of Coloproctology 35(6): 294. Hammarström, S. (1999). The carcinoembryonic antigen (CEA) family: structures, suggested functions and expression in normal and malignant tissues. Seminars in cancer biology, Elsevier. Kriangkum, J., B. Xu, L. P. Nagata, R. E. Fulton and M. R. Suresh (2001). "Bispecific and bifunctional single chain recombinant antibodies." Biomolecular engineering 18(2): 31-40. Loud, J. T. and J. Murphy (2017). Cancer screening and early detection in the 21st century. Seminars in oncology nursing, Elsevier. Mohr, L., A. Yeung, C. Aloman, D. Wittrup and J. R. Wands (2004). "Antibody-directed therapy for human hepatocellular carcinoma." Gastroenterology 127(5): S225-S231. Pucca, M. B., T. B. Bertolini, J. E. Barbosa, S. V. R. Galina and G. S. Porto (2011). "Therapeutic monoclonal antibodies: scFv patents as a marker of a new class of potential biopharmaceuticals." Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences 47(1): 31-38. Raivio, T. L. and T. J. Silhavy (2001). "Periplasmic stress and ECF sigma factors." Annual review of microbiology 55: 591. Sahlmann, C. O., K. Homayounfar, M. Niessner, J. Dyczkowski, L. C. Conradi, F. Braulke, B. Meller, T. Beißbarth, B. M. Ghadimi and J. Meller (2017). "Repeated adjuvant anti‐CEA radioimmunotherapy after resection of colorectal liver metastases: Safety, feasibility, and long‐term efficacy results of a prospective phase 2 study." Cancer 123(4): 638-649. Shim, H. (2020). "Bispecific antibodies and antibody–drug conjugates for cancer therapy: technological considerations." Biomolecules 10(3): 360. Sompunga, P., N. Pruksametanan, K. Rangnoi, K. Choowongkomon and M. Yamabhai (2019). "Generation of human and rabbit recombinant antibodies for the detection of Zearalenone by phage display antibody technology." Talanta 201: 397-405. Song, P., Q. Pan, Z. Sun, L. Zou and L. Yang (2022). "Fibroblast activation protein alpha: Comprehensive detection methods for drug target and tumor marker." Chemico-Biological Interactions 354: 109830. Spindler, K.-L. G., C. Demuth, B. S. Sorensen, J. S. Johansen, D. Nielsen, N. Pallisgaard, E. Hoegdall, P. Pfeiffer and B. Vittrup Jensen (2018). "Total cell-free DNA, carcinoembryonic antigen, and C-reactive protein for assessment of prognosis in patients with metastatic colorectal cancer." Tumor Biology 40(11): 1010428318811207. Ten Haaf, A., S. Pscherer, K. Fries, S. Barth, S. Gattenlöhner and M. K. Tur (2015). "Phage display-based on-slide selection of tumor-specific antibodies on formalin-fixed paraffin-embedded human tissue biopsies." Immunology letters 166(2): 65-78. Xiang, W., Q. Lv, H. Shi, B. Xie and L. Gao (2020). "Aptamer-based biosensor for detecting carcinoembryonic antigen." Talanta 214: 120716. Yaghoubi, N., F. Z. Avval, M. Khazaei, A. Sahebkar and S. H. Aghaee-Bakhtiari (2022). "High diagnostic and prognostic value of miRNAs compared with the carcinoembryonic antigen as a traditional tumor marker." Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (Formerly Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents) 22(2): 206-214.
| ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 622 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 98 |